前言RNA的提取是肿瘤研究的重要内容。在乳腺癌的研究中，乳腺癌样品通常含有较高含量的脂肪组织和结缔组织，而脂肪组织由于密度小，通常漂浮于液面，使样品难以被充分研磨。若研磨不充分，会导致样品离心后不能得到明确清晰的分层，多数老师都会选择牺牲提取量以保证提取效果。深圳大学医学院的老师们正......

非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子，绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中；不仅如此，RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合成、加工和修饰、胞内运输和定位、功能......

Bradford的dye-bindingmethod是利用CoomassiebrilliantblueG-250（CBG）可与蛋白质结合而变色的特性来定量（Bradford,1976）；若试样中的蛋白质量较多，则结合到蛋白质而变色的CBG也多，因而呈色较深。下例是以一组标准蛋白质为对象，制作一条蛋白质量与吸光度的标准校正线。仪器用具:ELISA光度计（Dynatech）可......

DNA纯化及杂质去除酚类杂质的去除对植物中次生产物酚类物质的去除,普遍是在提取液中加入适量的抗氧化剂和螯合剂,防止多酚氧化褐变。在提取DNA过程中加入巯基乙醇、半胱氨酸、二硫苏糖醇、谷胱甘肽及抗坏血酸等巯基试剂,抑制氧化反应,避免褐化。在样品液氮研磨及提取缓冲液中加入高分子螯合剂......

一、问题：RT-PCR灵敏度：在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。可能原因：1．RNA被降解建议解决方法：在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA使用良好的无污染技术分离RNA；在将组织从动物体取出后立刻处理在100％甲酰胺中储存RNA；如果使用胎盘RNase抑制剂，不要加热超过45℃或pH超过8.0，否则抑制剂......

Western杂交时，为确认蛋白是否转至PVDF膜上，可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。1.氨基黑染色染液：0.5%AmidoBlack(w/v),25%isopropanol(v/v)and10%aceticacid.染色：将PVDF膜置于染液中染色数钟，ddH2O脱色。2.考马氏亮蓝染色染液：0.1%CoomassieBrilliantBlueR-250(w/v)and50%methanol(v/v)脱色......

基因工程的诞生基因工程是分子水平对生物遗传作人为干预，要认识它，我们先从生物工程谈起：生物工程又称生物技术，是一门应用现代生命科学原理和信息及化工等技术，利用活细胞或其产生的酶来对廉价原材料进行不同程度的加工，提供大量有用产品的综合性工程技术。生物工程的基础是现代生命科学、技术科学......

多聚酶联反应（PCR）可对特定基因进行扩增，因此被广泛应用于获取特定基因或基因片段及临床基因诊断等领域。早期最成功及普及的应用领域是获取某一目的基因，用于基因诊断有许多局限性，主要有两点，一是不能准确定量；二是由于太灵敏，容易交叉污染，产生假阳性。为克服上述不足，人们采取了许多方法，如杂交法、......

一、蛋白质盐析分离的原理：蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶)，当盐浓度增大到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中......

NorthernBlot继分析DNA的Southern杂交方法出现后，1977年Alwine等人提出一种与此相类似的、用于分析细胞总RNA或含polyA尾的RNA样品中特定mRNA分子大小和丰度的分子杂交技术，这就是与Southern相对应而定名的Northern杂交技术。这一技术自出现以来，已得到广泛应用，成为分析mRNA最为常用的经典方法。......

ELISA取样及运输注意事项一、血清提取方法：1.全血促凝管取血，轻轻颠倒两三次，放置片刻让全血凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。2.全血普通EP管取血，室温放置2h左右，让其凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。特别注意：取血清避免震荡，以防止溶血，溶血会对结果有影响。二、样本取量及运输每个指标......

[原理]蛋白质在十二烷基硫酸钠（SDS）和巯基乙醇的作用下，分子中的二硫键还原，氢键等打开，形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物，该复合物带负电，故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向正极迁移，且主要由于凝胶的分子筛作用，迁移速率与蛋白质的分子量大小有关，因此可以浓缩和分离蛋白质多肽。聚丙烯......

我们都知道基因剪刀CRISPR/CAS9技术今年大火，之所以这个技术这么火和其对基因操作的方便性，高效性，准确性及高性价比是分不开的。CRISPR/Cas9是一种能够对任何物种基因组的特定位点进行精确编辑的技术。其原理是核酸内切酶Cas9蛋白通过导向性RNA(guideRNA，gRNA)识别特定基因组位点并对双链DNA进行......

染色质免疫共沉淀测序（ChIP-Seq）是指对染色质免疫共沉淀（ChIP）获得的DNA片段进行大规模测序，并能把所研究蛋白的DNA结合位点精确定位到基因组上。RocheGSFLXTitanium、IlluminaHiseq2000和ABSOLID4这3种测序技术均可以用于ChIP-seq，其中采用IlluminaHiseq2000进行ChIP-Seq已有较多文献报道。ChIP-Se......

除了为克隆基因、预测编码蛋白而需要研究基因的构成外，当前在基因组学上的努力也包括对基因组构成的研究，以分析具有结构和调控因子插入的基因。近源物种分析成为比较基因组学的主要内容，被认为是研究进化、基因功能和人类疾病的重要方法。利用该方法分析微生物，特别是细菌的基因组，早在1996年就已......

维甲酸X受体是核受体的一种，为9-顺式视黄醇酸激活。RXR与其它核受体形成二聚体，如与CAR、FXR、LXR、PPAR、RAR、TR和VDR形成复合物，激活后，复合物与RXR识别位点结合，启动靶基因转录，通过调控RXR活性与共激活剂和共抑制剂的相互作用，调控RXR活性。通过包含的带Myc标签的RXR表达载体，美国Signosis公司的......