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细胞实验技术

  • 我猜你不知道,细胞转染率低是因为这个

    细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段,也是论文发表的必备实验之一。而转染效率低下却是实验狗们经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,更是因为难度大,号称谁碰谁死。细胞转染实验方法和实验步骤,中洪菌在上期实验专栏中已经详细介绍了,(实验专栏丨千万别"作死",细胞转染可以这样做←......

    2018-04-17
  • 细胞冻存、复苏及细胞计数存活测试

    细胞冻存方法一般来说,细胞进行转移,最佳的策略是进行低温保存(-70℃~-196℃),而细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均已停止,即代谢处于完全停止状态,故而可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程,在此温度范围内,冰晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。经过......

    2018-03-12
  • 实用哺乳动物细胞培养手册(上)

    细胞培养基本概念细胞培养实验细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、......

    2018-02-28
  • 关于细胞冻存及细胞复苏

    冷冻保存方法按照冷冻保护液在冻结后是否形成冰晶来划分,冻存方法可分为非玻璃化和玻璃化冻存两种。非玻璃化冻存是利用各种温级的冰箱分阶段降温至-700C~-800C,然后直接投入液氮进行保存;或者是利用电子计算机程控降温仪以及利用液氮的气、液,按一定的降温速率从室温降至-1000C以下,再直接投入液氮......

    2017-12-06
  • 流式细胞术在环境检测中的应用

    随着流式细胞术的发展,流式细胞仪越来越多的使用在环境相关的研究及检测中。相对于传统的平板法与显微计数法,流式细胞术具有快速、灵敏、精确并能进行多参数分析的特点,且在后期使用成本上具有一定的优势。自1993年流式细胞仪首次运用于活性污泥中微生物群落结构分析以来,该技术逐渐成为空气、土......

    2017-12-02
  • 细胞活力检测

    在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力.细胞活力检测意义编辑由组织中分离细胞检查活力以了解分离过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查细胞活力,了解冻存和复苏的效果。......

    2017-11-30
  • 3D细胞培养

    传统细胞培养技术在模拟细胞体内生存环境方面做得还不够。3D细胞培养技术的发明就是为了在细胞培养过程中,为细胞提供一个更加接近体内生存条件的微环境......

    2017-10-28
  • Transwell侵袭实验总结之操作步骤

    一、将小室放入培养板中在上室加入300µl预温的无血清培养基,室温下静置15-30min,使基质胶再水化。再吸去剩余培养液。二、制备细胞悬液①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12-24h,进一步去除血清的影响。但这一步并不是必须的。②消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的无血清培......

    2017-10-26
  • MTT检测细胞活性的操作方法

    一、MTT是什么MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。二、MTT法用来做什么简单地说:是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT主要有两个用途1.药物......

    2017-10-24
  • 细胞瞬时转染

    原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。应用:观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。一般流程:1)细胞接种:转染......

    2017-10-19
  • 细胞分离技术

    1.从原代组织中分离细胞将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。(1)胰......

    2017-10-18
  • 软琼脂克隆形成实验

    一、原理细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数,但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细......

    2017-09-29
  • 细胞划痕实验

    细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。材料:6孔板、marker笔、直尺、20微升枪头(灭菌)、无血清培养基、PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比......

    2017-09-28
  • 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

    实验材料新生儿脐带试剂、试剂盒:PBS、胶原酶、M199培养基、胰酶、EDTA、DMEM培养基仪器、耗材:针头、手术钳、离心管、低温离心机、弯管、明胶、恒温培养箱、显微镜实验步骤1.将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。(注:4℃下最多贮存24小时,室温下不超过6小时,否则废弃)2.用一个钝头的......

    2017-09-26
  • 肿瘤细胞体外传代培养及保种

    实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒:液氮、EDTA、保种液仪器、耗材:恒温水浴锅、低温离心机、方瓶、CO2培养箱、-70度冰箱、弯管、显微镜、离心管、滤膜实验步骤一、细胞复苏与培养将液氮或-80℃保存的肿瘤细胞于37℃水浴,快速溶化,用8.0ml培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液,于1500转/分,离心3分钟。弃上清......

    2017-09-19
  • 人脐动脉平滑肌细胞培养实验

    人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒:胶原......

    2017-09-16
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