原位杂交组织(或细胞)化学(InsituHybridizationHistochemistry，ISHH)简称原位杂交(InSituHybridization)，属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同，原位杂交可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。根据......

如果让外星人来对人类进行检查，他们可能会认为人类就是用来喂养微生物并且能够带着微生物四处走动，如奴隶一般的有机体。我们体内细菌的数量是细胞总数的十倍还多，据估计所有细菌的DNA加起来包含330万个不同的基因，这一数目是人类基因总数的大约160倍。我们小肠中大约寄居了1千克的细菌来帮助我们......

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于......

材料和试剂细胞培养1.6cm细胞培养皿(Fiosher)2.人类或小鼠细胞系，细胞试验所需要的生长培养基3.凝聚胺(海美溴铵;SigmaH9268)4.合适的选择性抗生素。仪器1.细胞培养箱步骤慢病毒感染方法应该根据不同的细胞系和以细胞为基础的试验来进行优化。例如，下列的参数应该在大规模的感染之前进行优化，以......

经过早期筛查确诊的肺癌患者不同于其他类型的癌症，后期依然要面对严重的死亡率。即便是手术成功，大约35-45%的Ⅰ期肺癌患者，也会在5年内由于复发而死亡。当前，对于早期肺癌的评估，医生结合肿瘤的大小、位置以及显微表型等信息，进一步指导术后治疗。对于有局部淋巴结扩散的肺癌患者，标准治疗方法是手......

单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。动物免疫取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2mL/只；两周后进行第二......

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。一、污染原因(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，......

本方法无需传统TRIZOL提取方法的相分离，而且不需要使用任何有毒有害的试剂（例如氯仿），7分钟就可完成整个操作步骤并且可以提取到含microRNA的总RNA。1.先用TRIZOL或类似的试剂裂解样品本表格针对各种样品列出了参考用量，详细用量请参见说明书a)细胞样品针对细胞重悬液，添加3倍体积的TRIZOL到1体积的......

虽然TriumX-100是从鼠肝质膜溶解胰岛素受体的一种良好的去垢剂，但它未必适合其他膜蛋白的溶解。这里，介绍一种筛选去垢剂的策略以确定它是否适于溶解某一待分离的膜蛋白。实验步骤蛋白检测操作程序1)将膜制备物悬浮于所选的缓冲系统（如，磷酸缓冲液或HEPES缓冲液）中。缓冲液浓度应为50mmol/L,pH应接......

PCR产物克隆大致分为两类，即平头连接和粘头连接。平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoRV或SmaI切成平头；PCR产物纯化后，可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min（利用该酶所具有的3'→5'外切酶活性和5'→3'的聚合酶活性）。如果要求不高，PCR产物也可不加处理。如果......

做ChIP（ChromatinImmunoprecipitation）已经几个月了，虽时间不长，但深刻体会细节决定成败，这里就把自己认为值得注意的细节总结如下：1、cellcounting：尽量做到准确，会影响input结果。2、crosslink：甲醛的终浓度是1%，这个基本所有的protocol上都会强调。3、resuspendcellswithSDS:一定要选用小的tip头，在液......

随着RNAi现象的发现和研究到microRNA成为全球生物研究者关注的热点，与其相关的各种概念不断刷新我们的认识，siRNA、shRNA、microRNA、pre-miRNA、pri-miRNA、microRNAmimic、microRNAinhibitor、agomir、antagomir，各种RNA让刚刚接触RNAi的人头昏脑涨，那么，现在让我带大家认识一下他们各自有什么特......

实验方法原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即folin-酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色......

斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的简单技术。用来检测被印迹的1DNA制品中靶序列的相对丰度。多样抽滤法实验材料DNA试剂、试剂盒SSCNaClNaOHTris·Cl仪器、耗材紫外透射仪电泳仪多样抽滤加样器实验步骤1.裁一张与多样过滤加样器一样大小的尼......

摘要：多重pcr通过在同一个反应中同时完成多个基因的扩增成为临床与基础研究领域中一种简便快捷的筛选检测方法。已有大量文献详细的讨论了通常影响PCR反应质量的条件，而在多重PCR中常见的困难和重要的实验因素却鲜见报道。本文使用多对引物对多重PCR的各种条件进行了研究。研究表明，对于成功进行......

杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒，病毒粒子呈杆状，基因组为环状DNA分子，DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内，大小在90~180Kb之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应用于害虫防治。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒：琼脂牛血清仪器、耗材：培养瓶冻存管实验步骤1......