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细胞中mRNA原位杂交技术（四）

1 原位杂交固定的目的是为了保持细胞结构，最大限度地保存细胞内DNA或RNA的水平，使探针易于进入细胞或组织。DNA较稳定，RNA易被酶解，在RNA定位上，若要使RNA的降解减少到最低限度，取材后应尽快予以冷冻或固定。
2 玻片包括盖片和载玻片用热肥皂水刷洗，自来水清洗干净后，置于清洁液中浸泡24h，清水洗净烘干，95%乙醇中浸泡24h后蒸馏水冲洗、烘干，烘箱温度最好在150℃或以上过夜除去所有RNA酶。盖玻片在有条件时最好用硅化处理，锡箔纸包裹无尘存放。
3 由于在手指皮肤及实验玻璃皿上均可能有RNA酶，为防止其污染影响实验结果，在整个杂交前一日置高温（240℃）烘烤以达到消除RNA酶的目的。要破坏RNA酶，其最低温度必须在150℃左右。
4 整个实验过程中，切勿切片干燥，否则会严重影响实验结果。

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