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【课题实验整体外包】-如何建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型?

目的:探讨建立树鼩肺成纤维细胞(TSLF)CA16感染实验模型的可能性?

方法:用肠道病毒CA16感染TSLF控制人肺成纤维细胞(KMB-17)。间接免疫荧光实验观察细胞毒性、病毒蛋白和感染相关受体SCARB2蛋白的表达,探针法检测病毒载量实时荧光定量PCR,以及β-作为内参染料法检测受体肌动蛋白的体内相对表达SCARB2基因,结合基因序列比对分析与感染的相关性?

结果:CA16感染TSLF可引起明显的细胞毒性变化。免疫荧光实验表明,感染病毒和受体SCARB2蛋白100TCID50/TSLF的105个细胞可达到48小时左右达到最大病毒载量。SCARB2基因高表达与感染有关,它的基因序列是否也与人类有高度同源性?

结论:CA16可以感染TSLF,Tupai SCARB2可以参与感染吗?

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