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【课题实验整体外包】-短刺法对兔膝骨关节炎软骨细胞Sox9、VEGF和ColⅩ表达的影响

目的:观察短刺法对兔膝骨关节炎(KOA)关节软骨细胞Y染色体的性别决定区域(Sox9)、血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和Ⅹ型胶原(ColⅩ)表达的影响,探讨短刺治疗KOA的作用机制。

方法:40只新西兰兔利用随机对照表随机分为正常 组(N组)10只、造模组30只,对造模组行Hulth手术法复制膝骨关节炎模型,X线评估造模情况,造模成功后随机分为对照组(M 组)、短刺组(CN组)和普通针刺组(NTN组),术后6周开始治疗,M组不予任何处理,CN组和NTN组取左膝关节单侧足三里、 内外膝眼、梁丘和阴陵泉穴,留针20 min,1次/d,一疗程5 d,共4个疗程,分别在治疗前和治疗结束后随机选取各组新西兰兔观 察其行为学改变;实验结束后观察软骨大体形态及组织学评分;Westem-Blot法检测Sox9和ColⅩ蛋白的表达;免疫组化检测 VEGF和ColⅩ蛋白的表达;RT-PCR检测Sox9和VEGFmRNA的表达。

结果:M、CN、NTN组在治疗前和治疗结束后兔行为学 及软骨大体观察发生明显改变;HE染色显示CN组和NTN组软骨组织损伤减轻,有修复趋势;N组、M组、CN组和NTN组软骨 Mankin评分差异均有统计学意义(P<0.01);CN组和NTN组较M组Sox9蛋白和mRNA表达升高、VEFG蛋白和mRNA表达降 低、ColⅩ蛋白表达降低(P<0.01);CN组和NTN组差异有统计学意义(P<0.01)。

结论:短刺法能有效治疗KOA,其作用机制可 能是提高软骨细胞Sox9 的含量,降低VEGF和ColⅩ的表达,抑制肥大细胞分化,从而维持软骨细胞的正常表型,使软骨得 到修复。

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