一、实验动物一般指标的观察

在进行毒性实验中，需要对以下指标进行观察：

1．发育状态  体格发育是否与年龄、品种相称，各部发育比例是否正常，有无畸形。

2．营养状态  丰满还是消瘦，检查时可用手抚摸实验动物背、腰部，营养良好时，背腰部厚实，皮肤弹性好。营养不良时，背腰部椎骨突出，肋骨明显。

3．精神状态  实验动物的自主活动、运动情况，对外界的反应(迟钝或亢进)、步态如何。

4．感觉器官  眼睛的瞳孔是否清晰等，有无分泌物，眼睑有无发炎及红肿，眼结膜颜色变化，有否潮红、苍白、黄染或发绀。

5．呼吸系统  动物呼吸状态，如呼吸次数、节律、有无呼吸困难；上呼吸道检查如鼻腔分泌物多少、有无喷嚏和咳嗽；必要时可通过听诊检查肺部。

6．消化系统  采水与饮水观察，包括食欲废绝、减退、亢进和异嗜，口腔黏膜颜色和气味。有无呕吐、腹泻、便秘，肛周有无污物，粪便数量、硬度、颜色、气味等。

7．被毛和皮肤  检查皮肤颜色、温度、弹性、有无创伤、脓肿、疥癣、湿疹，毛发色泽、疏密、有无脱落。

二、实验动物的检查方法

1．体重的称量  可用普通天平或电子天平称重，动物称重前应禁食(不禁水)，以消除食物对体重的影响。

2．体温的测定  可用普通体温计(肛表、口表)或半导体温度计测量动物的体温，测量的部位、深度和时间应一致。肛表插入深度小鼠1.8cm，大鼠2.5cm，兔、犬和猴3～4cm，测量体温时一般要连续测2～3次，每次测量时温度计要在肛腔等处停留3～5分钟，环境温度对动物体温的测定有影响，一般环境温度应控制在18～28℃。

3．脉搏检查  大动物先略加固定，待安静后，用手指按股动脉测脉率0.5～1分钟，计算每分钟脉搏次数，小动物可直接用手触及左侧胸部心跳最明显处计数心搏次数。也可用听诊器进行听诊计数或用测量脉搏的仪器进行自动追踪记录。

环境温度、湿度、动物兴奋状态、饲养条件、健康状况、品种、年龄、性别、所处姿态等对动物的脉搏均有影响。

4．呼吸频率的测定  使动物保持相对安静状态，以肉眼观察并记录呼吸的次数，或用记录仪自动记录动物的呼吸次数。

5．心电图测定  可采用普通心电图机描记动物心电图，麻醉常引起动物心率变慢，动物惊恐挣扎及体位的变动也可引起心电图的变化，因此侧心电图时最好不用麻醉，反复训练动物以适应检查并保持安静，特别对犬、猴、兔最好采用此法。动物心率比人快、振幅小，所以描记低速一般为50mm/s、75mm/s或100mm/s，标定电压1mV=15～20mm，大动物固定电极部位应先剃毛、涂电极糊，小动物可采用针形电极直接刺入皮下。

6．一般血液学检查

(1)血红蛋白测定：测定血红蛋白的方法很多，常见的有直接比色，光电比色法，沙利氏比色法(间接比色法)。采用Hb-2000型血红蛋白仪。此仪器是采用氰化高铁法，应用光电比色的原理测定血红蛋白值的，其原理是：将全血样品20μl注入5ml氰化高铁血红蛋白稀释液内(亦称文-齐液)，做251倍稀释，溶化红细胞释出血红蛋白。稀释剂将血红蛋白先转变成高铁血红蛋白，再转化为氰化高铁血红蛋白。然后，再用Hb-2000型血红蛋白仪比色法直接测定显示浓度数，不需任何换算(每次测定只需5秒)。

(2)红细胞计数：血液中血细胞数的计算是使用血细胞计数板，而且要用适当的溶液将血液稀释后，放入计数板的计数室内，在显微镜下记录一定容积血液稀释液中的血细胞个数，再将所得结果换算成每立方毫米血液中的血细胞个数。

(3)白细胞计数：用血红蛋白吸管吸取20mm3的血液，再加到盛有0.38ml白细胞稀释液的试管内，并混匀，放置1～2分钟，待白细胞下沉后，就可将计数板置于低倍镜下进行计数。计数时，要注意显微镜的载物台应绝对平置，不能倾斜，以免血细胞向一边集中。光线也不必过强。白细胞的计数方法是，在低倍镜下计数，计数室四角4个大方格(每个大方格分16个中方格)中的白细胞的总数。对四边压线的血细胞，只数其中相连的两边(如上边和左边)，另两边(如下边和右边)的则不计。将数得的白细胞数乘以50或25，即得1mm3血液中白细胞的总数。

(4)血细胞比容的测定：测定血细胞比容时应控制离心力大小和离心时间。①温氏法：选用水平离心机，离心力为2300g，离心30分钟。②微量毛细管法：选用内径约0.8mm长约75mm均匀光滑的毛细玻璃管，吸入抗凝血30μl，约占管长的3/4处。封好底口，以高转(12 000r/min)平板离心机离心，离心力为15000g，离心5分钟。

(5)网织红细胞计数：于小试管中滴加1滴煤焦油蓝溶液，加入2滴血于小试管中，混匀，静置15～20分钟后，取1滴制成薄片，油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率表示。