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实验动物的处死方法很多,应根据动物实验目的、实验动物品种(品系)以及需要采集标本的部位等因素,选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法,都应遵循安死术的原则。安死术是指在不影响动物实验结果的前提下,使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意,首先要保证实验人员的安全;其次要确认实验动物已经死亡,通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察,对死亡作出综合判断;再者要注意环保,避免污染环境,还要妥善处理好尸体。
(一)安死术的概念 是指以人道的方法处死动物的过程。在处死动物的过程中减少动物的惊恐或焦虑,安静地、无痛苦地死亡。
(二)采用安死术必须符合的标准
1.死亡时没有惊恐、疼痛表现。
2.使其在最短时间内失去意识迅速死亡。
3.方法可靠且可重复。
4.对操作人员安全。
5.采取的方法要与研究要求和目的一致。
6.对观察者和操作者的情绪影响最小。
7.对环境污染的影响最小。
8.需要的机械设备简单、价廉、易操作。
9.处死动物的地点应远离并与动物房隔开。
(三)安死术的常用方法
1.颈椎脱位法 常用于大鼠和小鼠,右手抓住小鼠尾巴,将小鼠放在实验台上,左手按住小鼠头颈部,右手用力向后上方拉尾,感觉小鼠脊柱断开,小鼠便立即死亡。
2.断头法 实验者戴上棉纱手套,用右手握住大鼠头部,左手握住背部,露出颈部,助手用剪刀在鼠颈部将鼠头迅速剪掉。
3.空气栓塞法 常用于犬、猫、兔、豚鼠,向动物静脉内注入一定量的空气,使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后,可在右心随着心脏的跳动使空气与血液相混致血液成泡沫状,随血液循环到全身。如进入肺动脉,可阻塞其分支,进入心脏冠状动脉,造成冠状动脉阻塞,发生严重的血液循环障碍,动物很快致死。一般兔、猫等静脉内注入20~40ml空气即可致死。每条犬由前肢或后肢皮下静脉注入80~150ml空气,可很快致死。
4.急性失血法 大鼠和小鼠可采用眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使鼠立即死亡。家兔可采用颈动脉急性大量失血方法使家兔立即死亡。犬可先轻度麻醉,可按每千克体重静脉注射硫喷妥钠20~30mg,动物即很快入睡。暴露股三角区,用锋利的杀犬刀在股三角区做一个约10cm的横切口,把股动、静脉全切断,立即喷出血液。用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块,同时不断地用自来水冲洗流血,使股动脉切口处保持畅通,动物在3~5分钟内即可致死。
5.化学致死法 将动物装笼后放入透明塑料袋内,封好,慢慢充入二氧化碳,动物很快死亡。静脉内注入一定量的氯化钾溶液,使动物心肌失去收缩能力,心脏急性扩张,致心脏迟缓性停跳而死亡,10%氯化钾家兔耳缘静脉注入5~10ml,犬前肢或后肢下静脉注入20~30ml,即刻动物发生死亡。
6.药物麻醉法 适用于大鼠、小鼠和家兔等。将大鼠或小鼠放进浸透乙醚的密闭的容器内,盖紧,数分钟后动物因麻醉过度而死亡;也可给大鼠、小鼠、豚鼠和家兔腹腔注射戊巴比妥(90mg/kg),动物很快死亡。
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