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姜黄素纳米乳的制备及对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用

目的    构建姜黄素(CUR)纳米乳给药系统并研究其对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用和作用机制。

方法    制备姜黄素纳米乳(CUR-NMs)并通过透射电镜对其进行形态表征;以冠状动脉左前降支结扎法建立大 鼠心肌缺血再灌注模型,随机将大鼠分为假手术组、模型组、CUR 处理组和 CUR-NMs 处理组,CUR 处理组和 CUR- NMs 处理组在缺血前 4 h 分别腹腔注射 CUR(20 mg / kg)和 CUR-NMs(20 mg / kg)预处理, 模型组以等体积溶剂预处理;检测各组大鼠血流动力学变化;TUNEL 染色检测大鼠心肌细胞凋亡情况;试剂盒检测 CK、LDH、MDA 和 SOD 水平;蛋白印记实验检测心肌 calpain1、calpastatin、Bcl-2、cleaved-caspase 3 蛋白表达变化。

结果    制备的 CUR-NMs 大小均一,形态圆整,粒径为(121±23) nm。 模型组大鼠缺血 30 min 再松开灌注 2 h 后 LVDP、+dp / dtmax 和-dp / dtmax 指标均明显下降(P<0. 01),血清 LDH、CK、MDA 明显升高,SOD显著降低(P<0. 01);相较于模型组,CUR 处理组和 CUR-NMs 处理组大鼠 LVDP、+dp / dtmax 和-dp / dtmax 均有不同程度升高(P<0. 05 或 P<0. 01),LDH、CK、 MDA 显著下降,SOD 明显升高(P<0. 05 或 P<0. 01);与 CUR 处理组相比,CUR-NMs 处理组 LVDP、+dp / dtmax 和- dp / dtmax 升高幅度更大(P<0. 01),LDH、CK、MDA 降低,SOD 升高(P<0. 05 或 P<0. 01)。与假手术组相比,模型组心肌细胞凋亡明显增加(P<0. 01),calpain1 和 cleaved-caspase 3 蛋白表达明显上调,Bcl-2 和 calpastatin 蛋白表达显著下调(P<0. 01);相较于模型组,CUR 处理组和 CUR-NMs 处理组心肌细胞凋亡明显减少(P<0. 01),calpain1 和 cleaved-caspase 3 蛋白表达显著下调,Bcl-2 和 calpastatin 蛋白表达明显上调(P<0. 05 或 P<0. 01);与 CUR 处理组相 比,CUR-NMs 处理组心肌细胞凋亡明显减少 ( P < 0. 01) calpain1 和 cleaved-caspase 3 蛋白表达下调, Bcl-2 和 calpastatin 蛋白表达上调(P<0. 05 或 P<0. 01)。

结论    CUR-NMs 可改善大鼠心肌缺血再灌注损伤,且效果优于 CUR;该效应可能与增强细胞摄取、抑制 calpain1 蛋白表达和活性有关。

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