内参一般选用管家基因表达的蛋白，它们在各个组织细胞中表达相对恒定，不会因为外部条件变化而引起表达量的变化。而且内参可以监测整个试验体系是否正常，比如蛋白提取过程，转膜体系，显色体系等。

       2. 在做多组织多细胞样本对比表达量时，最好选用 GAPDH 作为内参，因为 GAPDH 是代谢类蛋白，在活组织中表达比较恒定。而 beta Actin 和 beta Tubulin 是结构蛋白，不同组织的细胞结构会有差异性，如脑组织的 tubulin 的表达会高一些（因为神经细胞的轴突和树突都由 tubulin 维持结构），而 actin 的表达量可能会低一些。

       再比如，骨骼肌、心肌和平滑肌的特殊功能反而导致了 tubulin 的表达改变和特化。心肌的 beta Actin 的表达量可能变少，而 alpha Actin 表达量高。因为这些组织的差异，现在慢慢采用总 Actin 和总 tubulin 作为内参，可以尽量减少一些组织表达量差异。

（本文转载丁香通）