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【课题实验整体外包】-旋转通气培养法建立小鼠睾丸体外培养模型

目的:寻找合适的培养条件,建立小鼠睾丸器官培养模型

方法:采用旋转通气培养法体外培养睾丸,优化培养条件,与Transwell细胞培养法进行形态比较。 HE染色观察睾丸组织结构变化,BrdU染色观察体外睾丸细胞增殖,放射免疫法观察睾丸体外分泌能力,免疫组化观察睾丸。

结果:通过比较培养结果,旋转通气培养法培养的睾丸组织形态更加完整。睾丸的大小为 0.3-0.8 mm3、各组精原细胞增殖指数呈上升趋势,支持细胞增殖指数呈下降趋势:3d组精原细胞增殖指数升高与1d组差异有统计学意义(Pu003c0 .05)),5d组的Sertoli细胞增殖指数显着升高。与第1d组相比,下降有统计学差异(Pu003c0.05)。睾酮分泌随着培养天数的增加而减少,差异有统计学意义(Pu003c0.05)。培养3天后,在Leydig细胞的细胞质和Sertoli细胞波形蛋白的细胞质中发现3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、细胞色素P45017α羟化酶(P450c17)和胆固醇侧链裂解酶(P450Scc)蛋白的表达。增加。可见(波形蛋白)表达。

结论:通过旋转通气培养成功建立了睾丸器官体外培养模型。

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