目的：利用CRISPR/Cas9基因编辑技术高效构建Bpi基因敲除小鼠模型，继续育种、鉴定和构建稳定的Bpi基因敲除小鼠品系。

方法：在C57BL/6小鼠Bpi基因第二至第三外显子两端设计敲除靶点，筛选高活性gRNA（guideRNA）靶点，通过体外转录获得sgRNA（smallguideRNA）。在显微镜下与 Cas9 mRNA 结合。将C57BL/6小鼠的受精卵注射入受精卵，通过胚胎移植将其移植到代母小鼠中获得F0小鼠后，通过基因型鉴定和DNA测序获得基因突变阳性的后代。

结果：由此筛选出高活性gRNA靶点，成功获得体外转录本sgRNA。连同Cas9 mRNA，通过显微注射获得了64个状态良好的受精卵，并成功移植到两只代孕母鼠体内。已收购22个。仅针对F0代小鼠，经过PCR鉴定和DNA测序，选择708bp碱基单链缺失的阳性小鼠进行扩增，在F1和F2代检测到突变，F2代成功培育纯合小鼠。

结论：Bpi基因敲除小鼠模型的成功构建为进一步研究Bpi基因及其表达产物的生物学功能奠定了基础。