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目的:评价登革热病毒实时荧光定量RT-PCR方法,并将其应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。
方法:首先选择合适的特异性引物和探针,通过分子生物学方法制备质粒标准品,优化PCR体系和反应条件。接下来,我们将评估实时荧光定量T-PCR 方法的灵敏度、特异性和稳定性。最后,我们确认了该方法对感染登革热病毒的小鼠的血清和组织样本的适用性。
结果:证实了一步法实时荧光定量RT-PCR方法,灵敏度更高,最低检测线为49.6拷贝/μL,该方法特异性优良,特异性优良,无非特异性扩增。稳定性极佳,样品Ct值好,所有标准偏差均小于0.5、CV 5?full,登革病毒感染小鼠模型样品的检测结果与实验结果一致。
结论: QRT-PCR方法可作为登革热小鼠模型病毒定量检测评价的重要指标检测方法。
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