目的:采用C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst型乙肝病毒转基因小鼠与rAAV8-1.3HBV腺相关病毒 转染小鼠联合CCl4腹腔注射诱导乙肝肝纤维化小鼠模型,比较两种小鼠模型的病毒学及生化病理特点｡

方法:实验分野生型对照组(WT)､rAAV8-1.3HBV转染组(rAAV)､CCl4组(CCl4)､rAAV8-1.3HBV 复合 CCl4 模型组 (rAAV+CCl4),C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst乙肝病毒转基因组(Tg)､转基因复合CCl4 组(Tg+CCl4),共计造模12周｡ELISA试剂盒测定血清HBsAg､HBeAg水平,荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA载量,肝组织石蜡切片免疫组化染色观察肝内HBsAg及HBcAg的表达,生化试剂盒测定血清ALT､AST､AKP,盐酸水解法检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量｡HE染色及天狼星红染色观察炎症与胶原等病理变化｡

结果:除WT组､CCl4组,其余各组ELISA检测血清HBsAg､HBeAg均呈阳性,同时荧光定量PCR检测HBV-DNA载量均高于1.0×104IU/mL｡其中Tg+CCl4组HBsAg､HBeAg含量高于rAAV+CCl4组｡rAAV､rAAV+CCl4组HBV-DNA水平高于Tg､Tg+CCl4组｡免疫组化表明:除WT组､CCl4组,其余各组肝组织中HBsAg与HBcAg均呈阳性｡rAAV组对比Tg组,HBsAg表达减少;rAAV组相比Tg组,HBcAg表达明显增多｡Tg+CCl4与rAAV+CCl4相比,HBsAg结果无明显差异,rAAV+CCl4组HBcAg阳性表达明显增高｡生化结果显示:CCl4组､Tg+CCl4组､rAAV+CCl4组血清ALT､AST及肝组织Hyp含量均显著升高;其中Tg+CCl4组Hyp含量高于rAAV+CCl4组｡AKP结果对比WT组无明显差异｡病理结果表明:对比WT组,rAAV与Tg组炎症与胶原沉积不明显;CCl4组､Tg+CCl4组､rAAV+CCl4组炎症反应及胶原沉积明显增高,其中Tg+CCl4组胶原沉积高于rAAV+CCl4组｡

结论:两种复合模型符合乙肝肝纤维化模型需求,其差异主要集中于病毒学指标以及病理改变｡rAAV+CCl4组在HBV-DNA载量上具有优势,Tg+CCl4组在纤维化进展更为明显｡