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原理:用豚草粉反复接触正常豚鼠或小鼠的鼻黏膜及结膜,刺激结膜组织产生特异性IgE抗体,附着于结膜的肥大细胞Fc受体使之主动过敏。当抗原攻击时,抗原一抗体结合,引起局部肥大细胞脱颗粒释放过敏物质,从而使局部血管的通透性增加,引起结膜充血及水肿,并伴有局部嗜酸细胞浸润。根据结膜充血的程度及嗜酸细胞浸润及肥大细胞脱颗粒程度判定结膜变态反应程度。
1.模型制作方法 取雌性Hartly豚鼠或SWR/J雌性小鼠,用10μl微量移液管,将豚草粉(Ambrosia artemisiaefolia)1.25mg喷入动物鼻孔和结膜下穹部,每日1次,连续5d,豚鼠在第8~12天再加强1次。在第15天对豚鼠或第8天对小鼠进行抗原攻击,将豚草粉125mg喷入结膜下穹部。
2.观察指标与分析 抗原攻击20min后裂隙灯下判断结膜充血水肿情况。判断标准同印白蛋白诱发的主动变应性结膜炎。
组织学检查:同主动变应性结膜炎。
本方法所引起的变应性结膜炎与人眼的枯草热性结膜炎的致病方式及临床表现十分相似,因为:所有抗原是最常见的空气携带抗原;给药方式是最自然的过敏原接触方式;不用加佐剂;动物可产生高水平的抗豚草IgE及明显的变应性结膜炎的临床和组织学表现。本方法重复性好,经济实用,快速,容易操作。
本法是抗枯草热性结膜炎药物及其他抗过敏药物的筛选方法,在动物免疫之前用药。用药天数与喷豚草粉的天数相同,每日滴药次数由受试药物的药效学及药动学特点决定。
本方法应用Hartly豚鼠或SWR/J雌性小鼠所显示的临床和组织学过敏反应最明显。
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