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【课题实验整体外包】-人脐带间充质干细胞移植修复大鼠的卵巢早衰

目的:探讨人脐带间充质干细胞移植修复卵巢早衰大鼠卵巢功能的作用机制。

方法:将30只SPF级SD雌性大鼠随机选取10只作为对照组,其他20只大鼠建立POF模型,模型大鼠分为模型组(10只)和hUCMSCs移植组(10只)。观察各组大鼠卵泡情况和卵巢组织超微结构的变化,采用ELISA法检测血清中E2、FSH、AMH、ROS、8-OHdG水平,采用免疫组化和Western blot检测大鼠SOD1及UCP2的蛋白变化。

结果:HE染色显示:模型组与对照组比较闭锁卵泡数量上升,而生长卵泡数量下降(均P<0.05),hUMSCs移植组与模型组比较闭锁卵泡数量下降,而生长卵泡数量上升(均P<0.05);卵巢电镜观察结果显示:hUMSCs移植治疗后,大鼠卵巢细胞出现细胞核,核膜逐渐恢复,出现少量细胞器;ELISA结果显示:hUCMSCs移植组血清LH、FSH水平、ROS和8-OHdG生成量较模型组明显下降(均P<0.05),而与对照组、模型组比较,hUCMSCs移植组E2水平明显上升(P<0.05);免疫组化结果显示:与对照组比较,模型组免疫组化UCP-2、SOD1阳性细胞数增加,而hUCMSCs移植组UCP-2、SOD1阳性细胞数较模型组减少;Western blot结果显示:模型组大鼠卵巢组织中SOD1、UCP-2蛋白表达较对照组显著增加(P<0.05),经过hUCMSCs移植治疗后,SOD1、UCP-2蛋白水平较模型组明显下降(P<0.05)。

结论:hUMSCs移植可通过降低SOD1及UCP-2的表达,从而降低氧化应激反应,最终达到修复卵巢功能的作用。

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