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【课题实验整体外包】-miR-328在运动改善高血压大鼠胸主动脉L型钙通道表达中的作用

目的    探讨 microRNA-328(miR-328)在有氧运动改善高血压大鼠胸主动脉平滑肌细胞L型电压门控钙通道(volage-gated L-type Ca2+ channel,LTCC)表达的中促进作用。

方法    选取 12 周龄雄性正常血压大鼠(Wistar Kyoto,WKY)与自发性高血压大鼠(spontancously hypertensive at,SHR)随机分为正常血压对照组(WKY-C)、正常血压运动组(WKY-EX)、高血压对照组(SHR-C)、高血压运动组(SHR-EX),运动组进行12周中等强度跑台训练。12周后采用股动静脉置管术检测大鼠心血管反应;取大鼠胸主动脉,采用HE 染色检测胸主动脉形态, qPCR 检测LTCCα,和β,亚基mRNA、miR-328表达,Western Bloa 检测α,和β,亚基蛋白表达。离体实验,培养 WKY胸主动脉平滑肌细胞,脂质体转染 miR-328mimic和mR-328 ihibior使之过表达或沉默,检测LTCCαc及β,亚基mRNA和蛋白表达变化。

结果    (1)有氧运动可显著降低SHR体重、血压和心率;(2)运动可显著降低 SHR胸主动脉壁厚;(3)运动可显著降低SHR对去甲肾上腺素的升压反应和硝苯地平 Nifcdipine(LTCC阻断剂)的降压反应;(4)SHR-C组的LTCCαn及β,亚基mRNA、蛋白表达显著高于WKY-C 组,而SHR-EX组的α,c及β,亚基 mRNA、蛋白表达显著低于SHR-C组;(5)SHR-C组中miR-328的表达显著低于WKY-C组,12周有氧运动后 miR- 328 表达量显著增加;(6)离体实验中,与对照组相比,转染 miR-328 mimice组α,和β,亚基mRNA、蛋白表达显著下调,而转染miR-328 inhibitor组α,和β,亚基mRNA、蛋白表达显著上调。

结论    规律有氧运动可有效降低SHR血压,调控 miR-328靶向抑制LTCCα,和β,亚基的表达,可能是运动改善高血压胸主动脉LTCC重构的机制之一。

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