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目的 树立鼠痘病毒(ECTV)的TaqMan 探针法荧光定量 PCR 检测办法,并对实验室保管的裸鼹鼠组织样本、小鼠组织样本以及黄鼠组织样本停止检测。
办法 依据GenBank 中鼠痘病毒的 crnD 基因序列设计引物探针,树立 ECTV的FQ-PCR 检测办法,对保管的样本停止筛查,并对局部阳性样本停止测序审定。
结果 树立的 ECTV FQ-PCR 检测办法灵活度高、特异性强,最低能检测到 ECTV 核酸浓度为 10 copies/μ. 的样本,办法的规范曲线相关参数契合规范。运用该办法检测实验室 63 份裸鼹鼠脾组织样本和2 份小鼠脾组织样本,结果全为阴性,检测4只黄鼠组织样本,结果阳性率为 50%。阳性样本停止 PCR检测后测序比对为 ECTV 核酸序列。
结论 经历证,树立的 ECTV FO-PCR 检测办法可以灵活特异的对样本中的 ECTV 停止筛查,实验室小鼠的日常监测不应无视 ECTV 污染的潜在风险。
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