一.   服务介绍                          

       免疫荧光技术是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。

  二.实验方法以及步骤                    

       (1）切片冷风吹15 min；

     （2）PBS洗2 min×3；

     （3）滴 加一抗37 ℃ 1 h，PBS洗2 min×3；

     （4）滴加低倍景稀释液，稀释的2抗（FITC）37 ℃ 1 h，PBS洗2 min×3；

     （5）荧光 封片剂封片。
免疫组化抗原暴露法
 
      蛋白酶K消化法：0.25 mg/ml蛋白酶K滴染37 ℃20 min，PBS 2 min × 3；

      胰酶消化法：0.2% 胰酶滴染37 ℃ 20 min，PBS 2 min×3；

      胃酶消化法：0.4%胃蛋白酶（p H 2）滴染37 ℃ 20 min，PBS 2 min×3次；

      微波加热枸橼酸抗原修复法：用耐高温的塑料染缸装200 ml枸橼 酸抗原修复液，加盖微波大火（750 W）加热2 min沸腾，立刻转为小火（90 W）10 min，自然冷却至室温，蒸馏水冲洗2次，入PBS泡2 min；

      EDTA抗原修复法：用耐高温的塑料染缸装200 ml EDTA抗原修复液，加盖微波大火（750 W）加热2 min沸腾，立刻转为小火（90 W）10 min，自然冷却至室温，蒸馏水冲洗2次，入PBS泡2 min

       （2）PBS洗2 min×3；

       （3）滴 加一抗37 ℃ 1 h，PBS洗2 min×3；

       （4）滴加低倍景稀释液，稀释的2抗（FITC）37 ℃ 1 h，PBS洗2 min×3；

       （5）荧光 封片剂封片。

       冰冻切片免疫荧光法

       （本文来源丁香园）