生物学行业动态Industry dynamic
目的:建立分离高纯度肺微血管内皮细胞的方法,观察脂多糖(LPS)刺激下野生型小鼠和晚期糖基化终产物(RAGE)基因敲除小鼠的受体细胞,骨骼肌肌动蛋白的变化。
方法:微血管去除6-8周龄的野生型C57小鼠和RAGE基因敲除小鼠的肺,用I型胶原酶消化,用尼龙细胞过滤,并通过免疫磁珠法分离出原代小鼠肺。通过形态学和免疫荧光鉴定内皮细胞(PMVEC)后,用LPS(1 mg/L)刺激它们多次,并通过激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-肌动蛋白的变化。
结果:在显微镜下,可以看到原代培养的PMVEC为纺锤形或多边形,并通过细胞抗因子相关抗原(VIII-Ag)染色得到了高度纯化。 LPS刺激后,野生型小鼠的PMVEC骨架重排并形成应激纤维,RAGE基因敲除小鼠的PMVEC骨架完好无损。
结论:可以通过免疫磁珠法获得高纯度的小鼠肺微血管内皮细胞,RAGE参与LPS介导的小鼠肺微血管内皮细胞骨架的破坏。
上海展辉生物技术有限公司
地址:上海市浦东新区东方路
联系电话:400-689-6719
联系邮箱:3369352092@qq.com
联系我们:
4006896719
扫一扫
关注东洪博元更多动态