慢病毒平台
腺病毒是一种无包膜的球型结构的病毒,遗传物质为线型双股DNA形式。
腺病毒的特点:
(1)感染范围广对人致病性低;
(2)对增殖和非增殖细胞均具有感染性;
(3)能有效进行增殖;
(4)病毒滴度高;
(5)不整合到染色体中,无插入致突变性;
(6)外源基因装载容量大。由于腺病毒的这些特点使其广泛地应用于体外基因转导、体内接种疫苗、和基因治疗等各个领域。
中洪博元生物采用的AdMax重组腺病毒系统通过Cre/loxP 获得重组病毒,这个过程发生在HEK293细胞中,从 而避免在细菌中重组。将携带外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒基因组的包装质粒共转染包装细胞,借助Cre/loxP系统的作用实现重组产生腺病毒。该系统有多种优势,包括克服了传统共转染系统重组效率低的缺点;也避免了细菌重组中的种种不确定性;操作简单,重组效率高,实现了快速高效的腺病毒包装。另外,研究者还可以根据不同的实验需求构建相应的腺病毒穿梭载体。
三.技术特点
※复制缺陷型腺病毒颗粒,对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用;
※无需任何转染试剂,操作简单;
※适用于在难转染的细胞中进行RNA干扰、过表达特定基因或过表达特定microRNA研究和In vivo 实验;
腺病毒包装示意图
1. 客户提供目的基因信息或模板(或干扰序列),如果提供模板,需提供详细的质粒信息。
2. 目的基因序列最好不要超过5kd,插入基因片段越大,滴度越低。
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