分子生物学技术miRNA
质粒DNA提取可以:
(1)快速纯化质粒;
(2)用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
SDS碱裂解法(试剂盒提取)
实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。
提取质粒的基本步骤分为三步:
①细菌的培养和质粒的扩增
②细菌菌体的裂解
实验材料: 大肠杆菌
仪器、耗材: 超净工作台 培养箱 摇床 恒温水浴锅 台式离心机 取液器 低温冰箱 冷冻真空干燥机 电泳仪 水平电泳槽 紫外观测仪
实验步骤
一、材料与试剂准备
(1)Solution I :25 mM Tris-Hcl(pH7.4),10 mM EDTA(pH8.0),50 mM葡萄糖,高压灭菌,4℃保存。
(2)Solution II :0.2 M NaOH, 1%SDS 现配现用。
(3)Solution III :5 N KAc pH4.8,高压灭菌,4℃保存。
(4)3 M NaAc pH5.2,高压灭菌,4℃保存。
二、操作步骤
(本文来源丁香园)
上一篇:免疫沉淀-蛋白印迹法
下一篇:TNF-α生物学活性检测方法
上海展辉生物技术有限公司
地址:上海市浦东新区东方路
联系电话:400-689-6719
联系邮箱:3369352092@qq.com
联系我们:
4006896719
扫一扫
关注东洪博元更多动态