分子生物学技术miRNA
慢病毒包装简要步骤
以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293T细胞。
1. 取1.5 ml灭菌EP管,加入1.5 μg包装混合质粒和0.5 μg表达质粒以及250 μl的无血清培养基。轻柔混匀,室温孵育5 min。
2. 取1.5 ml灭菌EP管,取9 μl 脂质体2000 l溶于250 μl无血清培养基中。轻柔混匀,室温孵育5 min。
注意事项
2. 在慢病毒转染细胞的过程中最重要的一步是融合,只有一些较小的慢病毒载体才能转导进细胞,因此,病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤。
(本文转载生物帮)
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