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分子生物学技术miRNA

动物实验用miRNA
       动物体内RNAi药物(siRNA﹑miRNA﹑shRNA等)的一般给药方法与途径 
 
       一般来说,给药方法可分为全身给药(systemic delivery)和局部给药(local delivery)。

一、局部给药:


       迄今已有很多通过局部给药途径进行动物体内RNAi药物药效评价和国外RNA药物I-III期临床试验的报道。


       给药方式:局部给药是将RNAi药物分子(siRNA﹑miRNA﹑shRNA等)通过注射﹑滴入﹑涂抹或喷雾等方式直接导进到一个特定的组织或器官中。


       适用范围:局部给药的组织或器官包括眼部、耳部、鼻腔、呼吸道、肺部、皮肤(表皮、真皮和皮下组织)、膀胱、子宫腔等。


       优势:局部给药可直接应用裸RNA药物分子作用于靶向器官或组织。另外,局部给药相对全身给药在用药量上要少一些。


二、全身给药


       给药方式:由于体内大部分器官组织并不能够通过局部给药的方法将RNA药物分子直接导入,因此一般往往采用静脉注射的方式进行全身给药。


       适用范围:静脉给药适合于心脏、肝、肾、肺、肿瘤组织等血流丰富的组织器官。


       全身给药可能遇到的问题及解决方式:


       由于血液中存有大量的核酸酶(Rnases),会直接导致RNA药物分子的迅速降解,使得RNA干扰机制丧失或药效丢失。如何有效解决裸RNA药物分子在血液中的稳定性是十分关键的。


       其解决方案包括:


       1)化学修饰RNA分子(如,常规2′-OMe或胆固醇修饰等)

 

       2)利用功能高分子或脂质体载体包裹裸RNA药物分子,使其达到在血液中稳定循环。


       这样不仅解决了RNA药物分子在血液中的稳定性,同时,所做的修饰分子或包裹载体如具有特定靶向性,也可以解决RNA药物分子在全身传输中的组织器官靶向性难题,使其能够到达指定的病症部位或肿瘤组织。


       动物体内RNAi药物(siRNA﹑miRNA﹑shRNA等)的一般给药用量参考

       综合大多数报道的研究结果,进行动物体内实验时可参考如下用量剂量:

       1、局部给药 
 

      小鼠每次每个部位RNA给药量(小鼠一般体重约为15-25g):0.05-0.50mg


      大鼠每次每个部位RNA给药量(大鼠一般体重约为150-250g):0.1-1.0mg


       2、全身给药 

 

      小鼠每次RNA给药量(小鼠一般体重约为15-25g):0.5-5.0mg/kg


      大鼠每次RNA给药量(大鼠一般体重约为150-250g):1.0-10mg/kg

RNA提取

       (本文转载丁香通)

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